说明

一般描述

纯化无DNA溶菌酶K SAE0152已经过严格的质量控制测试，以确保通过35个循环对16S和18S rDNA（使用通用引物对）进行PCR扩增时，不存在可检测水平的污染DNA。

溶菌酶是一种由129个氨基酸与四个二硫键交联的单链多肽。1 它可水解（1à 4）肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的（1à 4）连接。2,3,4 该酶常用于通过水解存在于细胞壁中的肽聚糖来裂解细菌细胞。革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感，因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。革兰氏阴性菌就对这种水解没那么敏感，因为它们有外膜并且肽聚糖的比例较低。

该酶在广泛的pH范围（6.0至9.0）内具有活性。

溶酶菌活性：≥40,000个单位/mg蛋白。

对于核酸的分离，溶菌酶已被用于裂解细菌细胞壁的肽聚糖层。

近年来，通过广泛采用与培养无关的分析技术（例如16S rRNA基因测序和宏基因组学），微生物群落的研究发生了彻底变化。由于样品制备过程中的DNA污染是这些基于序列的方法的主要问题，因此不含DNA污染的DNA提取试剂至关重要。这种纯化溶菌酶制剂（SAE0152）可从鸡蛋清中提纯，经过三次结晶，透析，然后作为冻干粉供应。通过紫外吸度度测定的蛋白质含量为≥90%，其余（10%）为乙酸钠和氯化钠等缓冲盐，经过严格的质量控制测试，以确保通过35个循环对16S和18S rDNA（使用通用引物对）进行PCR扩增时，不存在可检测水平的污染DNA。

应用

溶菌酶可用于从细菌细胞中提取基因组DNA。

溶菌酶可作为外部标准品用于MALDI-TOF（基质辅助激光解吸电离-飞行时间）质谱分析。

溶菌酶可用于制备原生质球。

酶可分解细菌的细胞壁；用于制备原生质体。

生化/生理作用

溶菌酶可水解肽聚糖中N-乙酰胞壁酸与N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间以及壳糊精中N-乙酰-D-氨基葡萄糖残基之间的β（1→4）连接。 革兰氏阳性细胞对这种水解非常敏感，因为它们的细胞壁中的肽聚糖比例很高。革兰氏阴性菌就对这种水解没那么敏感，因为它们有外膜并且肽聚糖的比例较低。然而，这些细胞可能在细胞外膜中螯合金属离子的EDTA存在的情况下水解。

该酶在广泛的pH范围（6.0至9.0）内具有活性。pH值为6.2时，可在更广的离子强度范围（0.02至0.100 M）观察到最大活性，而pH值为9.2时为0.01至0.06 M。

特点和优势

纯化的不含溶菌酶的SAE0152经过严格的质量控制测试，以确保其将不含DNA污染物，适用于微生物组研究。

近年来，通过广泛采用与培养无关的分析技术（例如16S rRNA基因测序和宏基因组学），微生物群落的研究发生了彻底变化。由于样品制备过程中的DNA污染是这些基于序列的方法的主要问题，因此不含DNA污染的DNA提取试剂至关重要。

单位定义

使用溶壁微球菌悬浮液作为底物，在2.6 ml反应混合物（1 cm光路）中并在25°C且pH 6.24的条件下，一个单位每分钟可产生0.001 A450的变化。