Thermo Scientific Pierce F(ab')2 制备试剂盒使用固定化胃蛋白酶选择性酶切完整的人和其他 IgG 抗体,以制成保留抗原结合活性的 F(ab')2 片段。
F(ab')2 微型制备试剂盒的特点:
•无酶的酶切产品—固定化胃蛋白酶(微珠状琼脂糖树脂)可用于控制酶切反应,并完全去除蛋白水解酶中的所得抗体片段
• 适用于人和其他物种的 IgG—该试剂盒程序针对人、兔和小鼠 IgG 进行了优化。基于胃蛋白酶的酶切对其他物种和亚类的 IgG 有效,但纯化步骤要求抗体与蛋白 A 有效结合。(注:对于小鼠 IgG1,为获得最佳结果,请使用产品编号 44980。)
•完整—试剂盒包括制备和纯化抗体片段所需的所有试剂
• 快速—离心形式可大大减少样品处理时间
• 灵活—包含用于多种物种和 IgG 亚类以及样品大小和浓度的方案。
•高效—增强得率和样品纯度
这些 F(ab')2 制备试剂盒适用于人、兔、小鼠和其他物种和亚类的 IgG,小鼠 IgG1 除外。在便利的一次性离心柱中使用胃蛋白酶琼脂糖进行抗体酶切反应,可高效去除固定化蛋白酶并尽可能回收 IgG 片段。试剂盒中还包含 Thermo Scientific NAb 蛋白 A 离心柱和缓冲液,能够高效纯化所得片段。蛋白 A 可结合 Fc 片段和未酶切的 IgG,在流过物组分中回收纯 F(ab')2 片段。该试剂盒还包含 Thermo Scientific Zeba 脱盐离心柱,用于快速制备 IgG 样品,无需稀释且并不利用耗时的透析步骤。
该试剂盒使用胃蛋白酶(非特异性肽链内切酶)对整个 IgG 的 Fc 部分进行酶促酶切,得到称为 F(ab')2 的片段。该片段由一对通过两个二硫键连接的 Fab' 单元构成。由于胃蛋白酶以固定化形式的微珠状琼脂糖树脂提供,可通过去除 IgG 溶液中的树脂轻松停止酶切反应;结果是得到无酶的酶切产品。