产品介绍:
美国Biotium Inc是荧光标记技术的全球领导者,其产品被世界科学家广泛用于生物化学,免疫学,细胞生物学和分子生物学,新药筛选等领域。该公司专利产品GelRed 和GelGreen核酸染料(EB和SYBR染料的替代者)已经在国内被广泛使用。EvaGreen PCR染料、CF系类和Mix-n-stain抗体标记染料、NucView Caspase 3/7 底物和PMA 活细胞检测试剂等一系列标志性的荧光染料,都是该公司的创新杰作。
GelRed 和GelGreen 是设计以取代剧毒的溴化乙锭(EtBr)的新一代的核酸凝胶荧光染料。 Biotium科学家研发的GelRed 和GelGreen 集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体,效果优于EB 及其他EB替代品。几十年来,EtBr 因其低廉的价格, 一般的灵敏度,一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而,EtBr 是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患、净化及废物处置的相关费用等,最终导致其代价高昂。正因如此,近年来市场上出现一些替代品,如SYBR® 染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性,但却丧失了染料其他方面的性能。例如,SYBR® Safe 的灵敏性很低,SYBR® Green 及SYBR® Gold 的稳定性远远低于EtBr。 SYBR® 染料能够快速进入细胞,结合线粒体及核DNA,使得染料在一定浓度更下是有毒的。事实上,在紫外线或其他诱变剂诱导下,SYBR®Green I 强烈的突变性已被广泛认知(Ohta, et al. Mutat. Res. 492,91(2001))。为了保证GelRed 和GelGreen 的安全性,Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念:阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信,不给DNA 结合染料渗透活细胞中结合基因组DNA 的机会,便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此,我们设计的GelRed 和GelGreen 染料的化学结构保证其无法渗透细胞膜。 Ames 试验证实即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度,GelRed和GelGreen 也无诱变性。此外,环境的安全性试验表明,GelRed 和GelGreen 是完全无害的,对水生生物无毒。因此,废弃的GelRed 和GelGreen 可以直接倒下水道,或按照普通垃圾处理。无论是作为预制凝胶染色或电泳后染色,GelRed和GelGreen 染料都是高度敏感的。312/302 nm 的紫外光透射下,GelRed 灵敏度远远超过EtBr, 与SYBR® Gold 灵敏度相当,后凝胶染色法GelRed 效果更明亮。与SYBR® Gold 不同的是,GelRed 也可以被作高度敏感的预制凝胶染色。 GelGreen 是用于488 nm 激光凝胶扫描仪或者可见蓝光激发的Dark Reader 的研究人员的使用要求。 GelGreen光谱类似于SYBR® Safe,但比后者更为敏感。GelRed 和GelGreen 另一个主要优势是其显着的稳定性。你可以用操作EtBr 同样的方式操作两种染料。这意味着,染料在水中是非常稳定的,可以在室温下长期储存,也可以在微波中加热进行预制凝胶。这两种染料也非常耐光,暴露在室内灯光下也比较稳定。
特 点
• 比EtBr 安全
艾姆斯氏和其他试验结果表明,该染料无任何诱变性及细胞毒性。
• 易于处理
已通过环境安全检测可以直接倒入下水道或作为普通垃圾处理。
• 超高的灵敏度
比EtBr 和SYBR®safe 灵敏很多
• 极好的稳定性
溶于水中,室温下能长期保存,微波炉加热性能稳定。
• 广泛的适用性
适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色
• 简单的步骤
预制凝胶和凝胶电泳后染色的操作都很简单
• 完美兼容标准紫外凝胶成像系统及可见光激发的凝胶观察装置
使用312nm 激发的UV 凝胶成像系统时,GelRed 可以完美的替代EB;无需改变成像条
件;GelGreen 完美替代SYBR® 或GelStar® 染料
本品用 DMSO 溶解,因 DMSO 的熔点是 18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解。
Goldview 是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测 DNA 时,Goldview与核酸结合后能产生很强的荧光信号, 其灵敏度与 EB 相当, 使用方法与之完全相同。在紫外灯下双链 DNA呈现绿色荧光,而单链 DNA呈红色荧光。
使用方法:
1. 将 100mL 琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为 0.8%~2%)在微波炉中融化。
2. 加入 5μL Goldview,轻轻摇匀,避免产生气泡。
3. 冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4. 电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照相记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项:
1. 胶厚度不宜超过 0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2. 加入Goldview的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响, 但不明显。
3. Goldview在 pH 3.6~7.0 之间能更好的与核酸结合,因此电泳时最好使用新鲜的电泳缓冲液。
4. 由于 Goldview产生绿色荧光,因此不适合于用一般单色胶卷拍照,可以使用凝胶成像系统保存图像。
5. 含有 Goldview的凝胶不适合于进行凝胶回收试验。要进行回收试验,请使用 SYBR Green I核酸染料。
6. Goldview特别适合于大片段 DNA 的检测(大于 1kb 的片段,检测灵敏度与 EB 相当);当DN**段小于 1kb 时,检测灵敏度低于 EB,特别是低于 500bp 的片段,Goldview可能亮度很弱或者检测不到,如要检测小片段的 DNA,请选用 SYBR Green I核酸染料,该染料适合检测所有片段大小的 DN**段。
7. 由于 Goldview溶液酸性较强,因此对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴手套。